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2013年 37卷 (5)期

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研究论文
贝类精子质量检测与评价方法研究Ⅰ:染色法检测马氏珠母贝精子的存活率的研究
2013, (5): 803-809.  doi: 10.7541/2013.102
[摘要](101) [PDF 1470KB](570)
摘要:
用曙红Y、台盼蓝染料对马氏珠母贝(Pinctada martensii)精子进行染色, 通过对不同制片方法、不同的染色时间和不同染料浓度的染色效果进行比较, 筛选出可通过染色特征来检测精子死活及活精率的适宜方法, 结果显示: (1) 经染色后, 死、活精子呈现出明显不同的特征: 活精子均不着色, 头部呈梨形、无色透明状; 死精子着红色(曙红Y染色)或蓝色(台盼蓝染色), 体积变大, 头部近圆形。(2) 曙红Y、台盼蓝最适染色浓度分别为0.04%和0.2%; 最佳染色时间均为15min。(3) 检测到的精子死亡率即实测精子死亡率, 与“理论死亡率”之间有明显的相关性, 相关系数为R=0.99 (PP>0.05), 说明在该时间范围内, 染液对精子的毒性较小, 精子存活率的检测结果稳定可靠。这些研究表明, 曙红Y、台盼蓝两种染色法准确灵敏, 均适宜用于马氏珠母贝精子质量的检测与评价。
塔里木河叶尔羌高原鳅繁殖生物学研究
2013, (5): 810-816.  doi: 10.7541/2013.103
[摘要](168) [PDF 7146KB](648)
摘要:
2010年7月至2011年12月, 在塔里木河阿拉尔段采集叶尔羌高原鳅Triplophysa (Hedinichthys) yarkandensis (Day) 940尾(除性别未辨个体外)用于繁殖生物学研究。种群雌雄比为0.85:1, 最小性成熟, 雌性个体体长为8.2 cm, 体重为7.4 g, 年龄为3龄; 雄性个体体长为6.5 cm, 体重为3.4 g, 年龄为2龄。叶尔羌高原鳅卵径分布呈单峰形, 推测应属于同步产卵类型。计算了88尾Ⅳ-Ⅴ期雌鱼的怀卵量, 其体长范围30-195 mm, 体重范围3.59-114.04 g, 绝对繁殖力为1101-56320 (9944±5487)粒, 相对繁殖力为824-1140 (982±158); 塔里木河阿拉尔段叶尔羌高原鳅种群繁殖力(Fp)为403.46万粒。
剑尾鱼P-糖蛋白基因全长cDNA克隆、分析及组织分布
2013, (5): 817-823.  doi: 10.7541/2013.104
[摘要](137) [PDF 376KB](572)
摘要:
P-糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp)为ABC转运体超家族的主要成员, 分布于细胞膜, 依赖ATP供能, 可将细胞内的亲脂性毒物或药物逆浓度泵出胞外, 在机体解毒上具重要功能。研究采用RT-PCR和RACE法对剑尾鱼P-gp基因进行克隆并获得了全长cDNA序列4301 bp, 该基因编码1286个氨基酸残基, 估算编码蛋白的分子质量为141.64 kD。生物信息学分析表明, 剑尾鱼P-gp不含信号肽序列, 具ATP转运家族蛋白的典型结构域, 包括2个疏水性的跨膜区(Transmembrane domains, TMD) 和2个位于细胞浆内的核苷酸结合区(Nucleotide-binding domains, NBD), 为全转运子, 每个跨膜区都有6个跨膜α螺旋, 而每个NBD包含1个ABC转运体家族标记序列; 跨膜性质预测结果显示该蛋白属膜蛋白, 具P-gp的典型特征。序列同源性分析发现, 不同进化地位动物P-gp存在高度同源性, 显示P-gp在系统进化上高度保守。P-gp在剑尾鱼肝脏、肾脏、脑等不同组织均有表达, 其中以肝脏的相对表达量最高, 是P-gp检测的代表组织。QRT-PCR实验表明, 苯并(a)芘胁迫可明显诱导P-gp mRNA的表达。剑尾鱼P-gp的表达水平或可作为一个生物标记物指标, 应用于环境持久性有机污染物的监测研究中。
综合养殖池塘中三角帆蚌和鱼类肠道细菌的组成
2013, (5): 824-835.  doi: 10.7541/2013.105
[摘要](134) [PDF 5453KB](720)
摘要:
采用PCR-DGGE (PCR-denaturing gradient gel electrophoresis)方法研究了综合养殖池塘中三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)、草鱼(Ctenopharyngodon idella)、鳊(Parabramis pekinensis)、银鲫(Carassius auratus gibelio)、青鱼(Mylopharyngodon piceus)和鳙(Aristichthys nobilis)的肠道细菌组成, 并分析了水体中的浮游细菌对鱼、蚌肠道细菌的影响。研究结果表明, 三角帆蚌和混养鱼类肠道细菌属于厚壁菌门(Firmicutes)、变形菌门(Proteobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)、疣微菌门(Verrucomicrobia)、蓝细菌(Cyanobacteria)、梭杆菌门(Fusobacteria)。其中, 三角帆蚌肠道优势菌群为不动杆菌属(Acinetobacter)、志贺氏菌属(Shigella)和分枝杆菌属(Mycobacterium), 草鱼肠道优势菌群为梭菌属(Clostridium), 鳊肠道优势菌群为梭菌属和假单胞菌属(Pseudomonas), 银鲫肠道优势菌群为不动杆菌属和志贺氏菌属, 青鱼肠道优势菌群为梭菌属和不动杆菌属, 鳙肠道优势菌群为不动杆菌属和弧菌属(Vibrio)。三角帆蚌与银鲫肠道细菌谱带相似性较高, 草鱼与鳊肠道细菌谱带相似性较高, 表明鱼类肠道细菌组成特点与食性存在一定的关系。水体浮游细菌优势菌群为类芽孢杆菌属(Paenibacillus)。三角帆蚌及鱼类肠道细菌群落与水体浮游细菌群落组成相似性较低, 表明水体浮游细菌对三角帆蚌和鱼类肠道细菌优势菌群的影响有限。
东江水系浮游植物功能群季节动态特征及影响因子
2013, (5): 836-843.  doi: 10.7541/2013.107
[摘要](95) [PDF 1597KB](702)
摘要:
2009年12月至2010年9月对东江水系进行了枯水期、平水期、丰水期的三次浮游藻类采集, 以分析浮游藻类功能群组成、季节变化特征及影响其季节变化的物理因子。结果表明, 东江水系浮游藻类在样品中出现频率大于10%的物种归入14个功能群, 分别是J、X2、P、W2、H1、MP、D、F、C、LO、W1、N、X1和 M。其中优势功能群是J、X2、P、W2、H1、MP、D、F、C、LO和 M。浮游藻类功能群组成明显随季节变化, 枯水期时功能群MP、D、P、X2、F、J和W2占优势; 丰水期时, 功能群MP、J、H1、LO占优势。除功能群理论中提到的营养(碳氮硅)、光照强度和生物作用(滤食)外, 水体物理因子——溶氧、水温、pH、TDS也是影响浮游藻类功能群季节动态的重要环境因子。研究表明温带湖泊调查提出的浮游藻类功能群概念用于河流生态系统浮游植物的研究是合适的。
黄沙鳖白底板病病原菌的分离鉴定及6种毒力基因检测
2013, (5): 844-854.  doi: 10.7541/2013.108
[摘要](114) [PDF 1512KB](681)
摘要:
用常规方法从患典型白底板病黄沙鳖的心脏、肝脏等处进行细菌的接种分离, 通过人工感染确定分离菌株的致病性, API 20NE、16S rRNA基因序列分析进行病原菌鉴定和确定其系统发育地位, K-B纸片扩散法进行药敏试验, PCR检测病原菌的6种毒力基因。试验结果, 共分离到13株病原菌, 其中嗜水气单胞菌9株, 温和气单胞菌4株。在9株嗜水气单胞菌中, 有5株与Aeromonas hydrophila ATCC 7966菌株亲源关系最近, 4株与Aeromonas hydrophila北京株QDC01的亲源关系最近; 而4株温和气单胞菌与Aeromonas sobria ATCC 43979的亲源关系最近。药敏试验结果, 仅头孢哌酮对13株病原菌都高度敏感, 来源于不同养殖区域的病原菌药敏结果相差较大。6种毒力基因的阳性率, Aer、Act和ahp均为100%, hly和Alt为92.31%, ahal为76.92%; 毒力基因型共有4种, 嗜水气单胞菌主要为hly+Aer+Alt+Act+ahal+ahp+基因型, 而温和气单胞菌主要为 hly+Aer+Alt-Act+ahal+ahp+基因型, 同时携带hly基因的菌株其致病力更强。
东海大陆架虾类资源量评估
2013, (5): 855-862.  doi: 10.7541/2013.109
[摘要](134) [PDF 5142KB](659)
摘要:
根据2008年春(5月)、夏(8月)、秋(11月)、冬(2009年2月)四季东海区桁杆拖虾网调查资料, 应用资源密度法首次估算了调查海域主要经济虾类和总体的现存资源量和最大持续产量(MSY)。结果表明: 调查海域虾类季度平均资源密度为203.5 kg/km2。根据季节分布, 以夏季最高, 冬季最低; 根据区域分布, 南部海域最高, 中部最低。调查海域虾类的现存资源量约为10.6×104 t, MSY约为22.2×104 t, 与2008年调查海域虾类渔获量比较, 表明该海域虾类资源总体利用略显不足, 尚有一定潜力。在主要经济虾类的现存资源量与MSY中, 以假长缝拟对虾Parapenaeus fissuroides最高; 与历史资料相比, 某些经济价值较高的种类, 如哈氏仿对虾Parapenaeopsis hardwickii、日本对虾Penaeus japonicus等的资源量明显减少, 而长角赤虾Metapenaeopsis longirostris等经济虾类较低的种类资源量有所上升, 这说明东海大陆架海域虾类资源组成情况已经发生了很大改变。
牙鲆MyoD基因单核苷酸多态性位点的筛选
2013, (5): 863-868.  doi: 10.7541/2013.110
[摘要](112) [PDF 486KB](575)
摘要:
运用PCR-SSCP技术研究100尾牙鲆(Paralichthys olivaceus)MyoD基因的单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphisms, SNPs), 并将筛选到的突变位点与牙鲆生长性状进行相关性分析。结果表明, 在外显子1和内含子1上存在3个SNPs, 在外显子1 (MyoD2)基因座发现3种基因型AA、AB和BB, G863A突变, 属于同义突变。在内含子MyoD4基因座检测到DD、FF、CD、CE、DE和DF型个体。利用最小二乘法研究MyoD基因多态性位点对牙鲆生长性状的影响。结果表明, 外显子1的SNPs对生长性状无显著影响(P0.05)。内含子1的SNPs对牙鲆的生长性状影响均显著(P0.05)。研究结果为SNPs位点与牙鲆生长性能关联分析奠定了基础。
淮河中游浮游甲壳动物群落结构的季节动态
2013, (5): 869-875.  doi: 10.7541/2013.111
[摘要](122) [PDF 607KB](740)
摘要:
2007年1-12月对淮河中游浮游甲壳动物群落结构的季节动态进行研究。共记录浮游甲壳动物24种, 其中枝角类8属13种、桡足类9属11种。枝角类在4月和9月形成两个峰值, 即(28.2±21.6) ind/L和(40.8±10.1) ind/L, 其优势种分别为僧帽溞 Daphnia cucullata和脆弱象鼻溞 Bosmina fatalis。捕食性桡足类-近邻剑水蚤Cyclops vicinus vicinus、广布中剑水蚤Mesocyclops leuckarti和台湾温剑水蚤Thermocyclops taihokuensis分别在4月、5月和6月形成较大的密度。汤匙华哲水蚤Sinocalanus dorrii和中华窄腹剑水蚤Limnoithona sinensis分别在5月和8月占优势。小型浮游植物(≤20 μm)生物量在4月达到最大值, 之后快速下降, 而较大型浮游植物(>20 μm)生物量从4月上升, 到7月达到最大值。典型冗余分析(RDA)显示, 溞属Daphnia的仲春下降与捕食性桡足类(尤其是近邻剑水蚤)的摄食压力、浮游植物生物量的季节变化密切相关。
斑点叉尾(鱼回)和杂交鲟幼鱼昼夜摄食节律和胃肠排空时间的研究
2013, (5): 876-884.  doi: 10.7541/2013.112
[摘要](113) [PDF 8914KB](565)
摘要:
采用一次饱食投喂(将一昼夜分为8个时间段, 每个时间段作为一个处理组, 每天每个处理组饱食投喂一次)和分段式连续投喂(将一昼夜分为8个时间段, 每天每个实验缸连续投喂8次)两种方法研究斑点叉尾(鱼回)和杂交鲟幼鱼的昼夜摄食节律, 同时研究它们在摄食后24h内胃和全肠的排空时间。结果显示, 在两种投喂方式下, 斑点叉尾 均表现出24h一周期的摄食节律, 两个日摄食率高峰值均出现在06:00和18:00 (P0.05)。杂交鲟在一次饱食投喂下表现出24h一周期的摄食节律, 高峰值分别出现在11:00、17:00和05:00, 在分段式连续投喂时表现出48h一周期的摄食节律, 高峰值分别出现在11:00、17: 00和36:00。在摄食后1-9h内, 斑点叉尾 的胃内含物比率急剧降低(P0.05), 并在24h时出现极低值(P0.05), 而1-9h内全肠内含物比率迅速升高(P0.05), 在9h时达到最大(P0.05), 在24h出现极低值(P0.05)。在摄食后1-7h内, 杂交鲟的胃内含物比率迅速下降(P0.05), 在24h时出现极低值(P0.05), 1-7h内肠内含物比率迅速升高(P0.05), 24h时呈现极低值(P0.05)。结果表明, 两种实验鱼表现出不同的昼夜摄食节律, 该节律受各自胃肠排空时间的影响, 也受投喂时间的影响。研究建议, 在斑点叉尾(鱼回)和杂交鲟幼鱼的养殖中宜在光线较弱的清晨(05:00-06:00)和黄昏(17:00-18:00)进行投喂。
大黄鱼头肾巨噬细胞体外模型的构建
2013, (5): 885-891.  doi: 10.7541/2013.113
[摘要](133) [PDF 1866KB](694)
摘要:
通过优化Percoll密度梯度离心技术,从大黄鱼 (Larmichthys crocea) 头肾组织中分离纯化巨噬细胞,并优化细胞培养条件。对所分离细胞进行形态学分析、普通光镜和电镜超微结构观察以及细胞功能验证实验。实验结果表明:细胞单层置于22℃无CO2恒温培养箱中,于L15培养基中培养5d后仍保持较高的活力。普通光镜和电镜观察到大黄鱼头肾巨噬细胞具有伪足发生和较强的吞噬能力、胞浆中富含线粒体以及吞噬小泡。巨噬细胞与不同浓度(0、0.1、1、20 μg/mL)的脂多糖(LPS,Escherichia coli 055:B5)分别孵育3h和24h。施加LPS刺激后,细胞呼吸暴发活性随LPS浓度以及孵育时间变化而变化。孵育3h后,0.1 μg/mL LPS协同PMA可显著诱导巨噬细胞活性氧中间体(ROI)的产生。孵育24h后,所有处理组LPS协同PMA显著抑制细胞ROI的生成(P 0.05)。未添加PMA时, 经1 μg/mL LPS孵育3h和24h后的巨噬细胞细胞ROI的生成量显著降低(P 0.05), 其他LPS处理组间细胞ROI的生成量无显著差异。
白鲢肝脏CYP3A序列分析及毒死蜱对其抑制作用研究
2013, (5): 892-898.  doi: 10.7541/2013.114
[摘要](101) [PDF 434KB](704)
摘要:
CYP3A是I相解毒酶系CYP450家族中的重要成员,在肝脏解毒过程中发挥重要作用。首次克隆了白鲢肝脏CYP3A基因并研究了毒死蜱对该基因表达的影响。生物信息学分析预测结果表明,CYP3A基因编码513个氨基酸,其蛋白质分子量为58.8 ku,理论等电点为7.96。该蛋白是一个稳定蛋白且具有一定的亲水性。二级结构预测可知,CYP3A包含45.2%的α-螺旋、12.3%的延伸链、4.3%的β-折叠和38.2%的无规则卷曲,具有2个显著的跨膜结合区。急性毒性实验结果表明,毒死蜱对白鲢具有很高的毒性,其96h LC50为0.172 mg/L。另外,荧光定量PCR检测发现,毒死蜱对白鲢CYP3A基因表达有明显的抑制作用。
中华绒螯蟹蜕皮过程中体壁结构和主要成分的变化
2013, (5): 899-904.  doi: 10.7541/2013.115
[摘要](89) [PDF 4234KB](349)
摘要:
采用组织化学和原子吸收分析等方法, 研究了中华绒螯蟹蜕皮过程中体壁结构和主要成分的变化。结果显示: 中华绒螯蟹体壁分为上表皮、外表皮、内表皮和膜层, 糖类物质各层均有分布, 胶原纤维分布在除上表皮外的其他各层。在蜕皮前, 糖类、胶原纤维都被重吸收, 体壁上表皮和外表皮在蜕皮前形成, 内表皮和膜层在蜕皮后形成。体壁粗蛋白含量在蜕皮前期(D1-D3-4期)降低(P0.05), 蜕皮后A-B期含量极高(P0.05)。几丁质含量在蜕皮过程中变化不显著(P0.05), 只是在蜕皮前稍有上升。Ca2+和Mg2+含量在蜕皮前D1期显著低于蜕皮间期和蜕皮前其他时期(P0.05), 而蜕皮后A-B期降到最低(P0.05), 蜕下的甲壳中则含有较多的Ca2+和Mg2+ (P0.05)。Cu2+和Zn2+含量除蜕皮后A-B期升高外(P0.05), 其余时期变化不明显(P0.05)。这些研究结果表明, 中华绒螯蟹体壁结构和成分变化与蜕皮周期密切相关。
38株维氏气单胞菌分离株的AFLP基因分型研究
2013, (5): 905-911.  doi: 10.7541/2013.117
[摘要](84) [PDF 964KB](340)
摘要:
试验通过人工设计合成的通用接头以及与接头序列相匹配的专用引物, 对38株维氏气单胞菌分离株和1株维氏气单胞菌标准菌株进行AFLP基因分型研究。结果显示, 采用5对引物使39株维氏气单胞菌扩增出1080条可见条带, 片段长度在50-1000 bp之间, 其中多态性条带727条, 平均每对引物组合产生154条多态性条带, 平均多态性检出率为66.7%。按UPGMA方法对条带进行聚类分析, 建立聚类分支树状图, 将39株维氏气单胞菌分为9个基因型, 其中第四类群基因Ⅳ型包含了14株菌株, 约占总菌数的35.9%, 分布在5个不同的地区, 推测其可能是引起斑点叉尾 发病的主要流行性基因型。不同地区分离的维氏气单胞菌具有地域性差异, 而同一地区分离株既存在相同基因型现象, 也存在基因型多样性现象。
两种温度下大黄素对团头鲂生长、血液指标及肝脏 HSP70 mRNA表达的影响
2013, (5): 919-928.  doi: 10.7541/2013.119
[摘要](112) [PDF 385KB](349)
摘要:
实验采用2×2双因子设计, 研究两种温度下在饲料中添加大黄素对团头鲂(Megalobrama amblycephala)生长、血液生理反应及肝脏HSP70 mRNA表达的影响。选取300尾健康的团头鲂[初均重(7.29±0.01) g], 两种温度下(25℃、30℃)分别投喂不添加和添加25 mg/kg的大黄素配合饲料, 养殖时间为77d。结果显示: 在长期30℃高温下, 鱼体增重率(WGR)和特定生长率(SGR)、红细胞积压(HCT)、乳酸脱氢酶(LDH)显著升高, 饵料系数(FCR)和脏体比(VSI)、谷草转氨酶(AST)、总胆汁酸(TBA)显著下降(P0.05); 添加25 mg/kg大黄素, SGR和肝体比(HSI)、红细胞积压(HCT)、乳酸脱氢酶(LDH)显著升高, 饵料系数(FCR)和摄食率(FR)显著下降(P0.05)。温度和大黄素对谷丙转氨酶(ALT)和血糖(GLU)无显著影响(P0.05), 对尿素(UREA)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、补体3 (C3)、补体4 (C4)和肝脏HSP70 mRNA的相对含量存在显著交互作用(P0.05)。与常温对照组相比, 高温对照组UREA、TG、TC显著下降; 在高温下, 添加大黄素组UREA、TG、TC有升高趋势(P0.05), C3、C4和肝脏HSP70 mRNA的相对含量显著升高(P0.05)。以上结果表明, 在饲料中添加25 mg/kg大黄素有助于缓解长期高温对团头鲂血液生理的影响, 提高补体水平和肝脏HSP70 mRNA的相对含量, 促进鱼体的生长。
大麻哈鱼胚胎耳石微结构及其群体环境标记
2013, (5): 929-937.  doi: 10.7541/2013.120
[摘要](85) [PDF 4383KB](382)
摘要:
采用人工调控环境方法对黑龙江、绥芬河大麻哈鱼发眼期胚胎群体耳石日轮进行周期性持续标记。实验分4组: 1组为对照组, 2-3组为变温标记组, 4组为“暴气”-变温标记组, 实验用发眼卵1.2万粒。待胚胎发育至耳石日轮结构形成后实施标记。实验胚胎耳石随着标记期间环境周期性变化及其持续的时间, 形成相应变化节律的日轮标记区。获得各实验组设定环境的日轮标记图谱。人工环境标记的耳石日轮图谱, 暗带色度加深, 明带亮度增大, 并可形成生长轮距不同的标记轮, 与对照组耳石微结构有明显区别, 标记率达到100%。初步建立鱼类耳石标记及其识别技术, 适用于大麻哈鱼等鲑鳟鱼类群体标记。作为安全有效、成本低廉的群体标记技术方法, 鱼类耳石日轮标记在鱼类资源评估和增殖放流效果评价中将会得到广泛应用。
综述
海洋无脊椎生物受精动力学模型:研究方法与应用
2013, (5): 938-944.  doi: 10.7541/2013.121
[摘要](78) [PDF 831KB](325)
摘要:
血红蛋白源抗菌片段的研究进展
2013, (5): 945-956.  doi: 10.7541/2013.122
[摘要](85) [PDF 318KB](294)
摘要:
研究简报
缘辐节藻属硅藻在我国的新记录
2013, (5): 957-959.  doi: 10.7541/2013.123
[摘要](93) [PDF 11606KB](273)
摘要:
中日褐菖鲉群体形态学比较研究
2013, (5): 960-966.  doi: 10.7541/2013.124
[摘要](91) [PDF 495KB](364)
摘要:
三个鲤品种微卫星丰度与遗传多样性分析
2013, (5): 967-973.  doi: 10.7541/2013.126
[摘要](97) [PDF 1826KB](419)
摘要:
蒙古鲌食性驯化及鱼种培育初步研究
2013, (5): 974-977.  doi: 10.7541/2013.127
[摘要](98) [PDF 252KB](296)
摘要:
两种鲟鱼卵在均匀流场中的漂移特性研究
2013, (5): 978-981.  doi: 10.7541/2013.128
[摘要](93) [PDF 292KB](357)
摘要:
基于454 GS FLX高通量测序的团头鲂ESTs中微卫星特征分析
2013, (5): 982-988.  doi: 10.7541/2013.129
[摘要](110) [PDF 668KB](364)
摘要:
一株耐碳酸氢钠产油绿藻的絮凝收集
2013, (5): 989-992.  doi: 10.7541/2013.130
[摘要](79) [PDF 584KB](335)
摘要:

期刊介绍

  • 创刊:1955年  双月刊
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国科学院水生生物研究所;中国海洋湖沼学会
  • 主编:桂建芳
  • ISSN 1000-3207
  • CN 42-1230/Q

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