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三峡水库水生态系统健康评价
叶麟, 谭路, 蔡庆华
[摘要](73) [HTML全文](35) [PDF 679KB](7)
摘要:
三峡水库是治理和开发长江的关键性骨干工程, 同时也是我国长江经济带生态环境保护的重点区域。在三峡水库蓄水后, 水文、水环境发生了根本性的变化, 随之也带来了一些负面的生态环境问题, 三峡水库生态系统是否健康成为国内外广泛感兴趣的问题。研究于2015年4月在三峡库区开展野外采样, 覆盖三峡水库23条支流库湾和18个长江干流断面, 共包括监测样点174个, 采用浮游植物群落指数系统评价三峡水库水生态系统健康状况。野外监测共发现藻类61种(含变种), 属于蓝藻、绿藻、硅藻、隐藻、甲藻、裸藻和金藻。基于浮游植物群落指数评价的结果显示三峡水库水生态系统健康状况较好, 健康及以上等级样点占68%, 亚健康样点占26%, 一般病态样点占6%。其中, 长江干流水体96%样点评价结果为健康, 仅4%样点为亚健康状态; 支流库湾水体健康状态为很健康、健康、亚健康、一般病态的样点比例分别为2%、53%、35%和9%。从空间分布上看, 长江干流水生态系统健康状况整体较好, 长江干流湖北段略好于长江干流重庆段; 靠近三峡大坝的支流库湾生态系统健康现状好于远离大坝的支流库湾; 三峡水库香溪河、梅溪河、小江等大型支流库湾水生生态系统健康状况变异较大。研究定量评价了三峡水库水体生态系统健康现状, 可为三峡水库生态环境保护提供科技支撑。
2019长江流域水生植物多样性格局与保护
吴志刚, 熊文, 侯宏伟
[摘要](51) [HTML全文](32) [PDF 994KB](8)
摘要:
为对长江流域尺度的多样性进行分析, 研究以不同时期发表的长江流域水生植物相关文献、专著等为基础资料, 选取了22种环境因子, 分析了长江流域水生植物多样性时空格局, 并应用MaxEnt软件建立物种分布模型预测流域水生植物适生区及主要影响变量。结果表明长江流域已报道分布的水生维管植物共有298种, 隶属于52科、121属, 占我国水生维管植物物种数的57.6%, 是我国水生植物多样性重要区域, 其中长江中游流域的物种多样性最高。海拔和土地利用类型是影响长江流域水生植物空间分布格局的主要因素。水系对于水生植物的隔离效应较小, 而河湖一体的特征使得中下游各流域物种组成较为相近。MaxEnt模型结果表明洞庭湖、鄱阳湖和太湖以及连接三湖的中游干流、下游干流流域是水生植物的适生区域。过去的半个多世纪, 长江流域水生植被出现了明显的退化, 建议建立以"两湖"为核心的长江中下游整体保护体系, 设立或更新现有保护区和管理区时应兼顾水生植被的保护。
中国绿水螅抗坏血酸过氧化物酶基因的克隆、抗体制备及表达分析
张行, 田晓晓, 董文芳, 王茹梦, 潘红春
[摘要](48) [HTML全文](31) [PDF 846KB](5)
摘要:
为探讨中国绿水螅(Hydra sinensis)抗坏血酸过氧化物酶(Ascorbate peroxidase, APX)基因的起源及功能, 研究采用RACE方法克隆了中国绿水螅APX基因的全长cDNA序列。该cDNA序列总长1357 bp, 包括5′非编码区107 bp, 3′非编码区146 bp及开放阅读框(Open reading frame, ORF) 1104 bp, 共编码367个氨基酸, 预测蛋白质分子量为40.79 kD。BLAST结果表明中国绿水螅APX蛋白同源序列绝大部分来自植物界; 通过最大似然法(Maximum-likelihood)和贝叶斯分析(Bayesian inference)进行的系统发生分析显示植物界及动物界物种的APX序列各自形成单系群。把APX基因ORF全长序列克隆到原核表达质粒pET-GST中, 重组质粒转化E. coli BL21 (DE3)菌株, IPTG诱导后成功表达重组融合蛋白GST-APX, 再使用纯化的重组蛋白免疫新西兰兔制备多克隆抗体用于APX蛋白的免疫印迹分析(Western blotting assay, WB)。在不同光照时长梯度(光强度2000 lx, 每天分别光照0、4、8、12、16、20及24h)下培养中国绿水螅30d, 实时定量PCR (Quantitative real-time PCR, qPCR)及WB检测结果均表明光照时间较长时(每天光照12h以上)绿水螅APX表达呈现一定程度的上调。在长时间光辐射下水螅体内共生绿藻连续进行光合作用所累积的大量活性氧能够扩散到水螅细胞内, 此时水螅体内表达上调的APX可能参与清除其细胞内的活性氧。
PFOS对中华倒刺鲃幼鱼暴发游泳及运动后代谢恢复的影响
夏继刚, 李秀明, 付世建
[摘要](48) [HTML全文](32) [PDF 963KB](3)
摘要:
为探究水体全氟辛烷磺酸(PFOS)污染对鱼类暴发游泳及其代谢恢复能力的影响, 将中华倒刺鲃幼鱼(Spinibarbus sinensis)暴露在不同浓度(0, 0.32、0.8、2和5 mg/L)PFOS后, 测定对其静止代谢率(RMR)、暴发游泳速度(Uburst)以及运动力竭后代谢恢复特征的影响。结果发现, 暴露浓度对实验鱼的Uburst和相对暴发游泳速度(rUburst)均影响显著(P<0.05), 5 mg/L PFOS暴露导致UburstrUburst分别下降了17.4%和10.8%, PFOS对rUburst的影响表现出“非单调剂量效应”; 暴露浓度对实验鱼的RMR影响显著(P<0.05), 5 mg/L PFOS暴露导致RMR显著升高, 但PFOS对运动后代谢峰值(MMR)、代谢率增量(MS)、代谢变化倍率(F-MS)、力竭运动后过量氧耗(EPOC)无显著影响(P>0.05)。研究结果提示: PFOS污染改变实验鱼能量代谢水平的下限, 而对其代谢水平的上限无明显的限制性作用; PFOS污染将可能对鱼类捕食——逃逸捕食者、穿越激流寻找适宜生境等生存关联的生命活动起到负面影响, 但对无氧代谢关联的代谢恢复能力无显著的生态毒理效应。
高邮湖沉水植物分布格局及其与水环境因子的关系
田翠翠, 郭传波, 吴幸强
[摘要](45) [HTML全文](31) [PDF 766KB](4)
摘要:
2016年对高邮湖沉水植物分布进行了采样调查, 并应用冗余分析法对沉水植物分布格局及其与主要环境因子的关系进行了研究。结果表明, 高邮湖现有沉水植物种类分布稀少, 其中春夏季菹草(Potamogeton crispus)是高邮湖沉水植物中绝对优势种, 其分布几乎遍及全湖, 穗状狐尾藻(Myriophyllum spicatum)和篦齿眼子菜(Potamogeton pectinatus)仅在个别点位少量分布。不同季节湖泊氮含量均可维持在Ⅲ类水标准, 而磷含量严重超标。相关分析发现, 沉水植物分布和透明度呈正相关, 与总磷、氨氮浓度显著负相关。Monte Carlo检验结果表明, 总磷和透明度是影响高邮湖沉水植物分布的主要环境因子。实验结果为进一步探讨高邮湖沉水植物资源的利用和保护提供依据。
三角鲂×翘嘴鲌、团头鲂×翘嘴鲌两种杂交后代微卫星遗传结构分析
苏晓磊, 郑国栋, 蒋霞云, 邹曙明
[摘要](78) [HTML全文](32) [PDF 509KB](2)
摘要:
为了指导三角鲂(Megalobrama terminalis)、团头鲂(Megalobrama amblycephala) 与翘嘴鲌(Erythroculter ilishaeformis)的杂交育种工作, 利用筛选出的16对微卫星引物, 比较分析了团头鲂、三角鲂、翘嘴鲌、团头鲂♀×翘嘴鲌♂、三角鲂♀×翘嘴鲌♂后代群体的遗传结构; 结果显示, 平均等位基因数(Na)分别为3.56、3.63、3.44、4.00和4.31, 平均观测杂合度(Ho)分别为0.3510、0.3757、0.3175、0.3818和0.4079, 平均期望杂合度(He)分别为0.6182、0.6290、0.5921、0.6490和0.6825, 平均多态信息含量(PIC)分别为0.5354、0.5367、0.5258、0.5785和0.6067。杂交群体的平均多态信息含量均大于他们的亲本团头鲂、三角鲂和翘嘴鲌, 表明杂交亲群体的遗传多样性较高。聚类分析显示团头鲂与三角鲂首先聚类, 团头鲂×翘嘴鲌与三角鲂×翘嘴鲌首先聚类, 然后这2大类聚为一支, 最后与翘嘴鲌聚类。其中团头鲂与翘嘴鲌遗传距离最远, 为0.5204, 团头鲂和三角鲂遗传距离最近, 为0.0853, 结合遗传相似度分析表明2种杂交子代均具有母本效应。基因型分析表明, 2种杂交后代的等位基因均来自于父母本。引物TTF3、TTF4、TTF10以及Mam25在5个群体中均可产生特异性条带, 可区分5个群体。研究结果对三角鲂×翘嘴鲌和团头鲂×翘嘴鲌的良种选育、种质资源保存以及种群鉴定具有重要意义。
稻虾轮作水体浮游植物群落结构特征分析
宋庆洋, 米武娟, 王斌梁, 黄宇波, 程咸立, 马达文, 毕永红
[摘要](42) [HTML全文](35) [PDF 902KB](7)
摘要:
为认识稻虾轮作水体浮游植物群落结构特征, 于2016年4月至12月对江汉平原4处稻虾轮作水体浮游植物和理化因子开展了逐月调查与分析。共鉴定出浮游植物7门124种, 其中绿藻78种、蓝藻16种、硅藻15种、裸藻3种、隐藻2种、甲藻7种、金藻3种。6—9月浮游植物的种类数、细胞密度、叶绿素a含量达到最大值, 最小值出现在12月份; 浮游植物细胞密度波动范围在1.37×105—2.93×108 cells/L, 叶绿素a含量的变化范围为0.15—208.60 μg/L。调查期间浮游植物的优势种共28种, 主要优势种有颤藻、蓝纤维藻、微囊藻、小球藻、隐藻等。浮游植物Shannon-Wiener多样性指数周年变化范围为0.64—6.3, 多样性指数最高出现在10月份, 最低出现在8月份。结果显示, 稻虾轮作水体浮游植物群落结构较复杂, 细胞密度变化显示时空的一致性, 优势种组成以及优势度存在明显的空间差异(P<0.05), 稻田的浅水环境以及小龙虾的养殖行为显著影响浮游植物群落的结构。鉴于藻类作为初级生产者对于水生态环境和小龙虾健康具有重要作用, 关注种养结合水体中藻类群落的演变规律对于保障稻田种养的综合效益具有积极意义。
饲料脂肪含量对两种规格的军曹鱼生长、体组成和血清生化指标的影响
刘迎隆, 麦康森, 徐玮, 张彦娇, 王震, 艾庆辉
[摘要](43) [HTML全文](31) [PDF 604KB](2)
摘要:
实验旨在确定2种规格军曹鱼的脂肪需求, 同时探索不同含量的脂肪对2种规格军曹鱼体组成及血清生化指标的影响。以鱼粉、酪蛋白和豆粕为蛋白源, 鱼油为脂肪源, 通过添加不同配比的鱼油配制6种脂肪水平(5.27%、8.22%、10.81%、14.26%、17.32%和20.94%(占干重))的等氮实验饲料。挑选(38.24±0.30) g(25尾/箱, 40 g规格)和(529.17±5.67) g(10尾/箱, 500 g规格)2种规格的军曹鱼, 置于浮式网箱(1.3 m×1.3 m×2.5 m)中每日饱食投喂2次, 分别进行10周和8周的摄食生长实验。结果表明:随着饲料脂肪含量的增加, 2种规格军曹鱼特定生长率(SGR)和饲料效率(FER)均先上升再下降, 而脏体比(VSI)与肥满度(CF)均显著升高(P<0.05)。另外, 随着饲料脂肪水平的增加, 40 g规格的军曹鱼肝体比(HSI)、鱼体、肝脏和肌肉脂肪含量均显著升高, 鱼体水分和蛋白含量显著下降(P<0.05), 而500 g规格的军曹鱼各处理之间未发现显著差异(P>0.05)。随着饲料脂肪水平的增加, 40 g规格的军曹鱼, 血清总甘油三酯(TG)、血清总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)及血糖(Glu)含量显著增加(P<0.05), 而500 g规格的军曹鱼, 除血清TG在各处理之间呈现出显著差异外(P<0.05), 其余指标在各处理之间均未发现显著差异(P>0.05)。综上所述, 以SGRFER为评价指标, 40 g左右规格的军曹鱼脂肪需求量为13.97%–14.16%, 500 g左右规格的军曹鱼脂肪需求量为13.18%–13.47%。
西江鲤仔稚鱼生长及消化酶活性变化
刘亚秋, 李新辉, 李跃飞, 李策
[摘要](38) [HTML全文](31) [PDF 574KB](6)
摘要:
为了探究了鲤(Cyprinus carpio)仔稚鱼的生长过程中主要消化酶活性变化规律, 实验测定了鲤从孵化出膜到40 日龄(日龄, Day after hatching)仔稚鱼期间的生长、可溶性蛋白含量和几种消化酶活性变化。结果显示: 仔稚鱼全长以及体重在15 日龄后增速加快, 特定生长率为14.81%。淀粉酶、脂肪酶、胰蛋白酶, 糜乳蛋白酶、碱性磷酸酶以及氨基肽酶在1 日龄仔鱼体内均能检测到活性。在仔稚鱼发育过程中, 其可溶性蛋白含量先下降后上升。仔鱼摄食前消化酶的活性出现一定的上升, 随着仔稚鱼消化系统发育以及营养方式的转变, 其消化酶活性从3到25 日龄处于不断的变化状态, 而25 日龄到实验结束鲤仔稚鱼的消化酶处于一种相对稳定的状态, 标志着其消化功能趋于完善。根据不同发育时期鲤消化酶活性的变化, 设计有机可腐化的材料制备人工鱼巢以提高人工鱼巢的生态修复功能, 降低饥饿对仔稚鱼成活率的影响。
翘嘴鲌胰岛素样生长因子-Ⅰ的克隆及序列分析
刘士力, 程顺, 蒋文枰, 迟美丽, 郑建波, 贾永义, 赵金良, 顾志敏
[摘要](37) [HTML全文](34) [PDF 1062KB](1)
摘要:
为了更好地探讨胰岛素样生长因子-Ⅰ(Insulin like growth factor-Ⅰ, IGF-Ⅰ)对于翘嘴鲌生长性状的影响, 研究对其DNA序列进行了克隆。翘嘴鲌IGF-Ⅰ全长14567 bp, 由5个外显子和4个内含子组成。其5个外显子长度分别为298、160、182、36 和1360 bp。推测的阅读框为486 bp, 编码由161个氨基酸组成的IGF-Ⅰ前体蛋白。前体肽由信号肽、成熟肽、E肽三部分组成, 其中信号肽44个氨基酸, 成熟肽70个氨基酸, E肽47个氨基酸。成熟肽由B、C、A、D四个区域组成, 其中B结构域和A结构域的保守性最高, 在这2个区域包含由6个半胱氨酸残基形成的3个二硫键。翘嘴鲌B区域还包含保守的IGF-Ⅰ受体识别序列(PheB23-TyrB24-PheB25)。E肽的长度表明翘嘴鲌IGF-Ⅰ属Ea-2型。同源性分析表明翘嘴鲌与鲤科鱼类的IGF-Ⅰ编码氨基酸同源性较高, 为94%—100%, 但在聚类分析中翘嘴鲌并不是首先和鲌亚科的鱼类聚集在一起。Real-time qPCR组织特异性表达结果显示IGF-Ⅰ mRNA在肝脏组织中的表达量最高, 显著高于其他组织, 脾、心脏、精巢、脑次之, 肾、鳃、胃和卵巢中表达量较低。翘嘴鲌IGF-Ⅰ基因4个内含子长度分别为1170、9 364、251 和1746 bp。相对外显子来说, 种间内含子变异较大, 其中第三内含子变异最大。翘嘴鲌IGF-Ⅰ基因中包含6个微卫星, (GATG)5AATAT (ATAG)11位于第一内含子中, (CT)8、(TTA)5、(AC)13、(TG)12和(ATT)5位于第二内含子中。其中4个微卫星位点具有多态性, 将它们在120尾同塘养殖的翘嘴鲌中进行基因型与生长性状的关联性分析, 均未达到显著水平(P>0.05)。结果为进一步研究该基因的表达、功能及其转录调控特征奠定了分子基础。
EFFECTS OF FASTING AND INSULIN TREATMENT ON BLOOD GLUCOSE AND LEPTIN-A GENE EXPRESSION IN CHINESE PERCH
Ling LI, Xu-Fang LIANG, Shan HE, Yan-Peng ZHANG, Xu CHEN, Dan SHEN
[摘要](51) [HTML全文](33) [PDF 373KB](1)
摘要:
Leptin has been reported to play important roles in regulation of glucose homeostasis in mammals. However, the relationship between blood glucose and leptin gene expression in teleosts is largely unknown. In the present study, blood glucose and leptin-A gene expression in liver, intestine and visceral adipose tissue were characterized in Chinese perch (Siniperca chuatsi) after fasting or insulin treatment. In the fasting experiment, Chinese perch were fasted for 10 days, sampling at 0, 4h, 2d, 6d and 10d after fasting. Blood glucose was significantly decreased at 10d after fasting; leptin-A mRNA expression was significantly increased in liver at 6d after fasting, and significantly increased in intestine and visceral adipose tissue at 4h after fasting. In the insulin treatment experiment, Chinese perch were intraperitoneally injected with bovine insulin (80 IU/kg body weight) or 0.7% saline as control, sampling at 12h and 36h post treatment. Blood glucose decreased significantly at 12h after insulin treatment, and leptin-A mRNA expression in intestine increased significantly at 36h after insulin treatment, which suggesting that prolonged fasting and insulin treatment decreased blood glucose, and increased leptin-A gene expression in fat depot organ and digestive organ of fish.
“太湖鲂鲌”及其亲本肌肉营养成分的分析与评价
姜建湖, 沈斌乾, 陈建明, 顾志敏, 贾永义, 孙丽慧, 黄爱霞, 李倩, 程海华
[摘要](40) [HTML全文](34) [PDF 433KB](3)
摘要:
为评价新型杂交鱼“太湖鲂鲌”(翘嘴鲌Culteralburnus♀×三角鲂Megalobrama terminalis♂)的肌肉营养价值, 采用生化测定法比较分析了“太湖鲂鲌”、翘嘴鲌和三角鲂的肌肉营养成分, 结果表明: (1)“太湖鲂鲌”肌肉水分含量显著低于翘嘴鲌和三角鲂(P<0.05), 而肌肉粗蛋白质含量较高(P<0.05)。(2)“太湖鲂鲌”的必需氨基酸(EAA)含量显著高于三角鲂(P<0.05); 3种鱼的第一限制性氨基酸均为含硫氨基酸(蛋氨酸+胱氨酸)。(3)“太湖鲂鲌”肌肉脂肪酸中的不饱和脂肪酸(UFA)含量显著高于翘嘴鲌和三角鲂(P<0.05)。(4)3种鱼肌肉矿物质元素铁、铜、锰、锌含量均无显著差异(P>0.05)。综上所述, “太湖鲂鲌”肌肉营养继承并综合了双亲的优良性状, 是一种富含蛋白质、EAA和UFA的优良养殖品种, 具有推广价值。
同域共存的两种平鳍鳅科鱼类消化系统的形态差异
胡佐灿, 解崇友, 蔡瑞钰, 王志坚
[摘要](58) [HTML全文](34) [PDF 828KB](1)
摘要:
为了探究同域共存的2种形态相似的平鳍鳅科鱼类的共存机理, 通过形态学、组织学和组织化学等方法对西昌华吸鳅(Sinogastromyzonsichangensis)和峨眉后平鳅(Metahomalopteraomeiensis)的消化系统进行观察比较。形态学结果显示, 它们的消化系统组成基本相同, 符合杂食性鱼类的特征, 但二者消化系统形态有明显差异。西昌华吸鳅肠道盘旋2回, 呈“φ”字形, 肝胰脏覆盖在消化管腹面; 峨眉后平鳅肠道盘旋5—7回, 肝胰脏镶嵌在消化管之间, 西昌华吸鳅在肠道系数、比消化系统重等形态学指数上大于峨眉后平鳅。组织学结果显示, 在消化道内黏膜褶皱高度、肌层厚度等特征上西昌华吸鳅显著大于(P<0.05)峨眉后平鳅, 肝胰脏没有显著差异。AB-PAS染色显示, 2种鱼消化道内黏液细胞种类相似, 多为Ⅱ型和Ⅳ型黏液细胞, 黏液细胞分布类型与大多数硬骨鱼类近似。消化系统形态学、组织学和组织化学特征能在一定程度上反映鱼类的食性和消化能力, 二者在形态学、组织学上的差异可能暗示着西昌华吸鳅和峨眉后平鳅在食性和消化能力上存在差异, 这可能是二者能够稳定共存的原因之一。
不同生物促生剂添加量对垂直流人工湿地水质净化效果的影响
童伟军, 郑文萍, 马琳, 张义, 贺锋, 吴振斌
[摘要](54) [HTML全文](34) [PDF 624KB](1)
摘要:
以垂直流人工湿地为研究对象, 探讨不同生物促生剂添加量对系统中N、P以及COD去除效果的影响, 并通过测定人工湿地系统中基质磷酸酶和脲酶来进行机理分析。结果表明, 添加生物促生剂可显著提高系统的脱氮效率, TN和 \begin{document}${\rm{NH}}_4^ + $\end{document} -N去除效率均达到80%以上, 较对照系统分别提高了71.5%和31.7%, 对TP和COD的去除效率最高可达到36.0%和91.6%, 较对照系统分别提高了9.1%和5.9%。同时可提高系统中基质磷酸酶和脲酶活性, 对系统中基质脲酶活性更具有显著性的影响, 基质磷酸酶、脲酶活性和COD去除率间存在显著正相关。研究中所采用的生物促生剂在本系统中最适宜添加量为5 μL/L, 即每升进水中添加5 μL生物促生剂。
饲料碳水化合物水平对拟穴青蟹稚蟹生长、体成分和消化酶活性的影响
董兰芳, 童潼, 张琴, 许明珠, 赵艳飞, 宋志飞, 苏琼, 聂振平, 马来
[摘要](40) [HTML全文](34) [PDF 498KB](3)
摘要:
用碳水化合物水平分别为20.34%、25.59%、30.17%、35.30%和39.95%的5种等氮等脂饲料, 对初始体质量为(38.11±0.55) mg的拟穴青蟹(Scylla paramamosain)稚蟹进行3周的饲养试验, 探讨饲料不同碳水化合物水平对稚蟹生长、体成分和消化酶活性的影响, 以期确定拟穴青蟹稚蟹饲料碳水化合物的适宜需要量。结果表明, 不同碳水化合物水平饲料对拟穴青蟹稚蟹的成活率、生长均有显著影响(P<0.05), 且均随碳水化合物水平的升高先显著增大(P<0.05)后显著减小(P<0.05), 且均在碳水化合物水平为30.17%时达到最大值; 随着饲料碳水化合物水平的升高, 拟穴青蟹稚蟹的蛋白质和灰分含量也呈先显著升高(P<0.05)后显著降低(P<0.05)的趋势, 均在碳水化合物水平为35.30%时达到最大值, 而稚蟹的水分和脂肪含量没有显著变化(P>0.05); 不同碳水化合物水平饲料组拟穴青蟹稚蟹的蛋白酶和脂肪酶活性的变化不显著(P>0.05), 而淀粉酶活性有显著变化(P<0.05), 高碳水化合物水平饲料组(35.30%—39.95%)稚蟹的淀粉酶活性显著高于低碳水化合物水平饲料组(20.34%—25.59%)(P<0.05)。在研究条件下, 饲料碳水化合物水平在25.59%—35.30%内, 拟穴青蟹稚蟹均表现出较好的生长率, 增重率和碳水化合物水平的回归分析表明, 稚蟹饲料碳水化合物的最适添加水平为29.93%。
三疣梭子蟹UHRF1基因在胚胎、幼体和性腺发育过程中的表达分析
蔡影, 孟宪亮, 刘萍, 李健, 环朋朋, 孙东方
[摘要](47) [HTML全文](30) [PDF 1047KB](5)
摘要:
为探讨泛素样含PHD和环指域蛋白1(UHRF1)基因在三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)发育过程中的作用, 实验采用SMART RACE方法, 克隆了三疣梭子蟹UHRF1(PtUHRF1)基因。该基因cDNA全长为2849 bp, 开放阅读框(ORF)为2298 bp, 预测其编码1个含有765个氨基酸的蛋白质。结构域分析显示, 该蛋白质包含UBL、PHD、TTD、SRA、RING finger 5个功能结构域。同源分析表明, 三疣梭子蟹PtUHRF1的氨基酸序列与其他物种有较高的同源性。qRT-PCR结果显示, PtUHRF1基因在三疣梭子蟹所有组织中均有表达, 但在精巢中表达量显著高于其他组织。该基因在胚胎和幼体发育不同时期表达差异显著, 在受精卵中的表达量最高, 并显著高于胚胎发育其他时期, 是多细胞时期表达量的2.5倍。PtUHRF1基因在性腺发育不同时期表达存在显著差异, 在卵巢II期表达量达到峰值, 之后逐渐下降; 在精巢I期的表达量最高, 随着精巢发育逐渐下降。实验结果表明, PtUHRF1参与了三疣梭子蟹胚胎、幼体和性腺发育调控, 为进一步深入研究该基因在三疣梭子蟹及甲壳动物生长发育中的作用提供参考。
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斑马鱼ints12的CRISPR/Cas9敲除及其对UsnRNA剪接的调控
黄思雨, 何牡丹, 王厚鹏, 孙永华
2019, 43(1): 1 -8 doi: 10.7541/2019.001
[摘要](215) [HTML全文](46) [PDF 846KB](25)
摘要:
整合因子(Integrator)复合体通过调控UsnRNAs(U-rich small nuclear RNAs)的转录成熟过程, 影响pre-mRNA的内含子剪切, 对生物体内形成成熟mRNA有重要作用。但是在脊椎动物中, 整合因子复合体的表达调控及其发育功能研究尚十分缺乏。研究利用斑马鱼(Danio rerio)模型, 通过CRISPR/Cas9技术构建了ints12 (Integrator subunit 12)的基因敲除品系, 得到了2种缺失不同碱基的突变品系。在ints12的合子突变体(Zints12)中, 通过荧光定量PCR分析, 发现UsnRNA的3′box剪切存在缺陷。与同龄的野生型斑马鱼相比, Zints12体型偏小且表现为全雄。进一步研究发现, 在Zints12成体中, 细胞增殖相关因子出现显著下调表达, ints12自身pre-mRNA的加工也出现内含子滞留, 表明ints12对自身mRNA的剪切存在一个“自循环”式的调控模式。研究获得了斑马鱼的ints12基因敲除纯合突变体并发现ints12通过调控UsnRNA的剪切参与斑马鱼的个体生长和发育。
东北七鳃鳗TRAF6基因克隆、表达分析及亚细胞定位研究
丁少青, 周泽斌, 王雅倩, 罗鑫, 何缘圆, 任建峰, 李伟明, 张庆华
2019, 43(1): 9 -16 doi: 10.7541/2019.002
[摘要](150) [HTML全文](56) [PDF 751KB](30)
摘要:
为研究TRAF6在TLR信号介导的先天免疫中的调控作用, 研究通过克隆技术获得了东北七鳃鳗(Lethenteron morii)TRAF6基因的cDNA全长, 命名为LmTRAF6。利用实时荧光定量方法(qPCR)分析了LmTRAF6在幼鱼和成鱼中各组织的表达情况以及在铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)感染后脂肪体、鳃、肠和肾组织在不同时间点的表达量变化。利用双酶切技术构建pEGFP-TRAF6重组质粒并转染HEK293T细胞, 48h后进行荧光观察并拍照。结果表明, LmTRAF6的cDNA全长为2751 bp, 开放阅读框(ORF)为1785 bp, 编码594个氨基酸。其蛋白结构域高度保守, 具有RING结构、两个锌指结构、环-环(Coiled-coil)α螺旋结构域和MATH结构域。通过系统进化树分析, 发现LmTRAF6与哺乳类以及鱼类TRAF6的亲缘关系较近, 与果蝇、中国对虾TRAF6的亲缘关系较远。qPCR结果显示, LmTRAF6在各组织中均有表达, 在幼鱼的心脏、皮肤、鳃、肝中的表达量相对较高, 而在肠中表达量相对较低。在成鱼的肾、鳃、肌肉中的表达量相对较高, 而在心脏中表达量相对较低。成鱼LmTRAF6在铜绿假单胞菌感染后, 鳃、肠和肾的表达量在24h达到峰值。细胞定位显示, LmTRAF6在HEK293T的细胞质和细胞核中均有表达。以上结果为进一步探究七鳃鳗中TRAF6在TLR信号通路中的作用奠定了理论基础。
太平洋鳕线粒体全基因组测序及结构特征分析
毛明光, 顾杰, 刘瑞婷, 陈雨, 吴玲梅, 姜志强, 蒋洁兰
2019, 43(1): 17 -26 doi: 10.7541/2019.003
[摘要](119) [HTML全文](42) [PDF 730KB](11)
摘要:
通过二代基因测序技术获得太平洋鳕(Gadus macrocephalus)线粒体基因组全序列, 对线粒体基因进行了注释, 对其序列结构进行了分析。研究结果表明, 太平洋鳕线粒体基因组全长16569 bp, 共编码13个蛋白质, 并且包含了22个tRNA, 2个rRNA以及1个D-Loop区。碱基组成存在明显的AT偏向和弱AT负偏斜现象。太平洋鳕线粒体在蛋白质编码基因中共有5种终止密码子, 包含哺乳动物线粒体常见终止密码子AGG与AGA。除tRNA-Ser(GCT)基因缺失二氢尿嘧啶臂(DHU臂)外, 其余tRNA均能形成典型的三叶草结构。D-Loop区只存在与终止结合序列区(Terminal associated sequences, TAS)和保守序列框(Conserved sequences blocks, CSB)功能类似的序列, 并且出现17 bp的嘧啶序列。非编码区含有一段保守的控制轻链复制起始的序列(OL)及一段74 bp的基因间隔区。基于线粒体基因组全序列和Cytb基因, 分别构建了鳕形目下几种鳕的进化树, 结果为揭示太平洋鳕进化地位提供了重要依据。
虹鳟Fc受体FcγR的α和γ亚基基因的克隆及表达分析
王鹏, 张弩, 张旭杰, 张永安
2019, 43(1): 27 -36 doi: 10.7541/2019.004
[摘要](114) [HTML全文](49) [PDF 1249KB](13)
摘要:
Fc受体(FcR)是一种表达在免疫细胞表面的受体分子, 由多亚基构成, 通过与免疫球蛋白(Ig)的Fc段结合引起包括炎症因子释放和吞噬作用等体液和细胞免疫反应。研究采用RACE技术首次克隆得到了虹鳟FcγR的α亚基基因(FcγRα)和γ亚基基因(FcRγ)的cDNA序列, 采用生物信息学软件对FcγRαFcRγ的序列进行了特征分析, 实时荧光定量PCR检测了其在不同组织和细胞亚群中以及在Poly (I鲶C)和LPS刺激后头肾中的表达。结果显示:FcγRα的cDNA全长1677 bp, 开放阅读框为954 bp, 编码317个氨基酸; FcγRα由信号肽和2个Ig样结构域构成, 但没有跨膜区和胞内区。FcRγ亚基存在2种形式, 分别命名为FcRγ1和FcRγ2(包含FcRγ2a和FcRγ2b两个剪接异构体), 它们均由信号肽、跨膜区和胞内的免疫受体酪氨酸活化基序(ITAM)构成。氨基酸序列相似性分析表明虹鳟FcγRα与斑点叉尾鮰FcRI相同率最高(30%), 虹鳟FcRγ1和FcRγ2a/2b与哺乳动物FcRγ相同率最高可达40%。组织表达显示FcγRαFcRγ1和FcRγ2a/2b在头肾、脾脏和血液中表达较高; 细胞亚群表达显示FcγRαFcRγ1和FcRγ2a/2b在髓样细胞群中表达最高; LPS和Poly (I鲶C)刺激后,FcγRαFcRγ1和FcRγ2a/2b在头肾中的表达显著上调, 这表明FcγR在机体抗细菌和抗病毒免疫中可能发挥重要作用。
脊尾白虾2种血蓝蛋白大亚基变体的克隆及功能分析
窦全伟, 李吉涛, 刘萍, 李健, 刘九美, 孙东方, 蔡影, 环朋朋
2019, 43(1): 37 -44 doi: 10.7541/2019.005
[摘要](88) [HTML全文](44) [PDF 865KB](9)
摘要:
为了探究血蓝蛋白的分子多样性, 对脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)血蓝蛋白大亚基变体进行了研究。基于脊尾白虾转录组文库血蓝蛋白大亚基变体EcHcL1和2序列, 利用RACE和生物信息学技术, 对2种变体进行全长cDNA扩增和序列分析。结果发现EcHcL1和2 cDNA 全长分别为2239和2132 bp, 编码685和676个氨基酸。EcHcL1和2氨基酸序列在进化上相对保守, 且均具有血蓝蛋白的典型结构域, 包括铜离子结合区域、保守His位点和Ig-like区等, 其中EcHcL1多了一个酪氨酸酶结构域, 推测可能与色素代谢及酚氧化酶活性有关。组织表达分布结果显示EcHcL1和2在血细胞、肝胰腺、肠、腹神经节、心脏、卵巢、眼柄、胃、鳃和肌肉等组织中均有表达, 且均在肝胰腺和血细胞中表达较高。采用Real-time PCR方法对病原感染后2种变体的mRNA表达情况进行分析。结果发现, EcHcL1在金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌和白斑综合征病毒(WSSV)胁迫脊尾白虾12—48h中出现较高表达量, 最高表达量约为对照组的1.5—4倍; EcHcL2在胁迫后24—48h后, 与对照组相比, 表达量约上升2—9倍。由此说明, 脊尾白虾血蓝蛋白大亚基变体与免疫防御密切相关, 可能在抵抗病原微生物感染中发挥作用。
中华鳖Foxl2基因克隆及外源性激素对其表达的影响
高丽丽, 刁晓明, 李云, 翟旭亮, 周春龙
2019, 43(1): 45 -51 doi: 10.7541/2019.006
[摘要](287) [HTML全文](142) [PDF 616KB](26)
摘要:
外源性激素在中华鳖(Pelodiscus sinensis)性别决定有重要作用, 为给中华鳖性别决定机制研究提供生物学信息, 首次克隆和分析了中华鳖Foxl2 cDNA部分序列。为研究其在遗传和生理水平的差异, 以10 mg/kg剂量17α-甲基睾酮(MT)和17β-雌二醇(E2)分别对中华鳖雌雄个体注射, 检测0、6h、12h、24h、48h、7d和14d性腺Foxl2 mRNA表达水平。获得中华鳖Foxl2基因(GenBank登录号: KP734210)部分 cDNA长903 bp, 共编码300个氨基酸, 属于叉头框转录因子家族, 参与卵巢发育和功能维持; 多重序列比对显示, Foxl2具有典型的FH结构域, 与红耳龟的同源性最高, 达到99%; 系统进化树分析显示, 中华鳖Foxl2基因与爬行动物Foxl2基因聚为一个亚支, 且与西部锦龟Foxl2基因距离最近。荧光定量PCR结果显示, 与对照组相比, 注射E2后24h, 卵巢Foxl2 mRNA表达水平被极显著上调(P<0.001), 7d和14d后, 精巢Foxl2 mRNA表达水平极显著上升(P<0.001); 注射MT后24h, 精巢和卵巢Foxl2 mRNA的表达水平均极显著升高(P<0.001)。结果表明, E2和MT促进Foxl2表达, E2促进其表达的性别差异比MT明显。研究可为了解Foxl2的功能及明确外源性激素调控中华鳖Foxl2的分子机制提供基础资料。
饲料β-葡聚糖和灭活乳酸菌的添加对泥鳅幼鱼生长性能、肠脂肪酸组成及免疫性能的影响
陈靖雯, 郭道远, 赵冰, 曹小娟, 高坚
2019, 43(1): 52 -59 doi: 10.7541/2018.007
[摘要](182) [HTML全文](42) [PDF 542KB](13)
摘要:
为研究饲料中添加β-葡聚糖(BG)和热灭活乳酸菌(HK-LP)对泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)幼鱼生长性能、肠道脂肪酸组成及免疫功能的影响,采用2×3双因素设计,设2个BG (0和1%)和3个HK-LP (0.025%、0.05%和0.1%)水平,选择初始均重为(0.17±0.01) g的泥鳅幼鱼,分别投喂6种配合饲料,每种饲料3个重复,饲养期为80d。结果显示,在饲料中分别添加BG和HK-LP显著提高了泥鳅幼鱼的终末体重、增重率、特定成长率,显著降低了饲料系数。然而,2种添加剂的相互作用没有对这些生长指标产生影响。添加BG显著降低了肠道脂肪酸中C16:1n-7和C18:2n-6的比率,同时随着HK-LP添加显著降低了C22:1n-11的比率。BG、HK-LP及两因素的相互作用均显著影响了体表黏液中碱性磷酸酶(AKP)活性,随着BG及HK-LP添加量的增加,溶菌酶(LZM)活性出现升高趋势。添加1%BG和0.05%HK-LP饲料,显著上调了热休克蛋白HSP70和HSP90α的表达水平,同时在BG未添加组,随着HK-LP添加的增加,上调了TLR1的表达水平。综上所述,饲料BG和HK-LP添加可以改善泥鳅幼鱼生长性能,其中BG 1%和HK-LP 0.1%的实验组对泥鳅幼鱼生长的促进作用最为显著。
氧化油脂对斑点叉尾鮰生长、体色和抗氧化能力的影响
梁高杨, 李小勤, 高启平, 还殿宇, 杨航, 徐禛, 冷向军
2019, 43(1): 60 -68 doi: 10.7541/2019.008
[摘要](95) [HTML全文](45) [PDF 440KB](18)
摘要:
为考察正常及氧化鱼油、豆油、混合油脂(鱼油﹕豆油=1﹕1)对斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus)生长性能、体色和肝脏抗氧化能力的影响, 设计6组等氮等脂饲料, 分别添加6%鱼油、6%豆油、3%鱼油+3%豆油、6%氧化鱼油、6%氧化豆油、3%氧化鱼油+3%氧化豆油, 饲喂6组初始体重(150.5±4.2 g)的斑点叉尾鮰8周, 每组3个重复, 每个重复14尾鱼。结果表明, 摄食6%鱼油、6%豆油、3%鱼油+3%豆油饲料的斑点叉尾鮰在增重率、饲料系数、肌肉组成、体色和肝脏抗氧化指标上均无显著差异(P>0.05); 摄食3组氧化油脂饲料后, 鱼体增重率和肌肉粗脂肪含量降低(P<0.05), 饲料系数和背部、尾部皮肤b*(黄度值)增加(P<0.05), 肝脏丙二醛(MDA)和血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)和直接胆红素升高(DBIL)(P<0.05), 肝脏超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、还原型谷胱甘肽降低(GSH)(P<0.05), 而肌肉色度值(L*、a* 、b*)和肌肉水分、粗蛋白质、灰分含量无显著差异(P>0.05)。以上结果表明, 6%氧化油脂(鱼油、豆油或混合油脂)导致斑点叉尾鮰生长性能下降、皮肤黄度增加、肝脏抗氧化能力受损; 豆油可替代斑点叉尾鮰饲料中鱼油的使用, 而不会对生长产生负面影响。
日光照周期对大菱鲆幼鱼摄食、消化酶活力与血清激素含量的影响
李宝山, 孙永智, 王世信, 黄炳山, 王际英
2019, 43(1): 69 -77 doi: 10.7541/2019.009
[摘要](257) [HTML全文](95) [PDF 530KB](76)
摘要:
研究了4种光照周期[24L﹕0D(D1)、16L﹕8D(D2)、8L﹕16D(D3)和0L﹕24D(D4)]对体重(30.5±2.0) g大菱鲆Scophthalmus maximus L.幼鱼20h (8:00am—4:00am)内摄食、消化酶活力、血清激素含量的影响。结果显示: (1)实验鱼的摄食率随光照时间的缩短而降低; D1组实验鱼每隔8h出现摄食高峰, 其他组均在8:00am及4:00pm出现摄食高峰。(2)D1、D2和D3组在12:00am和8:00pm出现肠道蛋白酶及淀粉酶活力峰值, 脂肪酶活力显著高于D4组(P<0.05)。(3)各组8:00am至8:00pm生长激素(GH)含量无显著变化, D1组4:00am时显著高于其他组(P<0.05), D4组0:00am及4:00am显著低于其他组(P<0.05); D1、D2和D3组初次摄食8h内皮质醇(COR)含量无显著变化, 8h后先升高后降低, D4组COR含量先升高后降低, 8:00pm时达到最高; D1和D2组0:00am时去甲肾上腺素(NE)含量显著高于其他组(P<0.05), D4组8:00pm时显著低于其他组(P<0.05); D2组8:00am及12:00am时三碘甲状原氨酸(T3)含量显著高于其他组(P<0.05), D4组8:00pm时显著低于其他组, 0:00am时显著高于其他组(P<0.05), D2和D3组4:00am显著低于D1和D4组(P<0.05), 各组T3最高值均出现在8:00pm。在实验条件下, 光照周期影响了大菱鲆幼鱼摄食、消化酶活力及血清激素含量。在此光照强度下, 大菱鲆养殖中以8—16h光照周期、日投喂2次为宜。
力竭追赶训练对两种鲤科鱼类呼吸循环系统参数和力竭运动后代谢特征的影响
李秀明, 张耀光, 何春梅, 郭海燕, 付世建
2019, 43(1): 78 -85 doi: 10.7541/2019.010
[摘要](218) [HTML全文](133) [PDF 537KB](19)
摘要:
为了考察力竭追赶训练对中华倒刺鲃(Spinibarbus sinensis)和岩原鲤(Procypris rabaudi)幼鱼呼吸循环系统和力竭运动后代谢特征的影响, 在(25±0.5)℃条件下, 将2种实验鱼各60尾 [体重分别为(28.36±0.08) g和(19.53±0.13) g]随机等分成对照组和训练组, 训练组进行1次/d共21d的力竭追赶训练。随后测定各组实验鱼的心脏和鳃指数、血液指标以及力竭运动后过量耗氧(Excess post-exercise oxygen consumption, EPOC)。结果发现: 2种鱼心脏指数、鳃指数、血红蛋白含量和红细胞数目在各自对照组和训练组之间都没有显著性差异; 岩原鲤对照组的鳃指数显著低于中华倒刺鲃对照组(P<0.05), 但心脏指数、血红蛋白含量和红细胞数目与中华倒刺鲃对照组无显著性差异。中华倒刺鲃训练组的运动前代谢率、运动代谢峰值、峰值比率、代谢恢复速率与其对照组没有显著差异, 但运动后恢复时间和过量耗氧显著大于对照组(P<0.05); 岩原鲤训练组的运动前代谢率显著低于其对照组(P<0.05), 但运动代谢峰值、峰值比率、运动后恢复时间、过量耗氧、代谢恢复速率与其对照组没有显著性差异。岩原鲤对照组的运动前代谢率、运动代谢峰值、过量耗氧和代谢恢复速率分别显著低于中华倒刺鲃对照组(P<0.05), 但峰值比率和运动后恢复时间与中华倒刺鲃对照组无显著性差异。研究表明: (1)力竭追赶训练对中华倒刺鲃和岩原鲤幼鱼的呼吸和循环系统参数没有产生显著性影响; (2)力竭追赶训练显著提高了中华倒刺鲃幼鱼的无氧代谢能力; (3)中华倒刺鲃幼鱼力竭运动前后代谢率显著高于岩原鲤幼鱼, 这可能与其较为活跃的习性有关。
模拟运输对异育银鲫血液生理生化指标、体色和肉质的影响
张玉平, 刘昊昆, 金俊琰, 朱晓鸣, 韩冬, 杨云霞, 解绶启
2019, 43(1): 86 -93 doi: 10.7541/2019.011
[摘要](183) [HTML全文](91) [PDF 447KB](36)
摘要:
实验以异育银鲫“中科3号”[Carassis gibelio var. CAS III, 平均体重(116.46±2.09) g)]为研究对象, 通过模拟汽车运输振动台模拟4h运输, 研究模拟运输对异育银鲫血液生理生化指标、体色和肉质及水质的影响。研究结果表明: 经过模拟运输后, 运鱼袋内水体氨氮显著升高(P<0.01), pH显著下降(P<0.05), 溶解氧含量升高(P<0.05)。模拟运输后异育银鲫血浆中皮质醇、葡萄糖和丙二醛浓度显著升高(P<0.01); 乳酸浓度显著降低(P<0.01); 谷胱甘肽过氧化物酶活力显著降低(P<0.05); 超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活力降低但差异不显著(P>0.05)。在模拟运输4h后, 异育银鲫背部亮度值(L*)显著降低(P<0.01), 黄色值(b*)在背部和侧线部较模拟运输前显著降低(P<0.01), 在腹部较模拟运输前显著降低(P<0.05), 侧线部和腹部的亮度值(L*), 以及背部、侧线部和腹部的红色值(a*)下降但差异不显著(P>0.05)。在模拟运输后, 异育银鲫背肌内聚性、咀嚼性和回复性显著降低(P<0.05), 硬度、胶黏性、弹性和黏性变化但差异不显著(P>0.05)。实验结果表明, 4h模拟运输能够引起运鱼袋水体水质情况改变, 诱导异育银鲫鱼体的应激反应, 导致实验鱼体色和鱼肉品质相关指标的变化, 降低了鱼肉品质部分指标。
罗伊氏乳杆菌对组胺引起黄颡鱼肝肠损伤修复效果评价
成艳波, 李薇, 韩木兰, 许国焕, 谢黎炜, 印遇龙, 梁建庆
2019, 43(1): 94 -101 doi: 10.7541/2019.012
[摘要](147) [HTML全文](87) [PDF 769KB](15)
摘要:
以黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)(14.23±0.65) g为实验对象, 分别饲喂3组等氮饲料(C组: 组胺含量147 mg/kg; H组: 479 mg/kg和H+B组: 496 mg/kg+1×105 CFU/g罗伊氏乳杆菌Lactobacillus reuteri), 进行56d的养殖实验, 研究组胺及罗伊氏乳杆菌对黄颡鱼的影响。结果显示, H+B组血清谷丙转氨酶(ALT)及谷草转氨酶(AST)活力显著低于H组(P<0.05), 而与C组无差异(P>0.05); H+B组肝脏谷胱甘肽S转移酶(GSH-ST)活力及丙二醛(MDA)含量显著低于H组(P<0.05), 与C组无差异(P>0.05); 肝脏HE染色显示, H组肝脏中有较多炎症细胞浸润, 而H+B组肝脏细胞结构完整, 无明显损伤; 肠道HE染色显示, H组肠道皱襞数量明显减少、长度显著变短, 有水肿发生, 而H+B组肠道皱襞数量、长度与对照组无差异, 水肿程度不明显。结果表明: 组胺会引起黄颡鱼肝脏、肠道损伤, 而罗伊氏乳杆菌对组胺引发的肝肠损伤有保护功效。
急性冷胁迫对中华鳖幼鳖肠道黏膜组织的影响
邢潇, 宋如昕, 王兰, 牛翠娟, 张左兵
2019, 43(1): 102 -108 doi: 10.7541/2019.013
[摘要](108) [HTML全文](51) [PDF 897KB](10)
摘要:
为了探究急性冷胁迫对中华鳖(Pelodiscus sinensis)幼鳖肠道不同区段黏膜组织学特征的影响, 实验检测了急性冷胁迫前后血清二胺氧化酶(Diamine oxidase, DAO)的活性, 同时观察了急性冷胁迫前后中华鳖肠道黏膜的相关组织形态的差异。DAO活性显示: (1)在第一次急性冷胁迫实验中, 中华鳖血清DAO活性随急性冷胁迫时间的增加而呈现降低趋势, 并在冷胁迫到达48h降到了最低水平; (2)在急性冷胁迫及复温实验中, 中华鳖血清DAO的活性, 在冷胁迫3d后显著降低, 但随着温度的恢复, DAO活性又恢复到正常水平。组织病理结果显示: (1)急性冷胁迫对中华鳖肠道(回肠后段和大肠)黏膜上皮的形态没有明显影响; (2)急性冷胁迫对回肠后段的杯状细胞数目、肠绒毛长度和绒毛长度/隐窝深度的比值没有显著影响, 但会使回肠后段黏膜厚度显著降低; (3)急性冷胁迫会使大肠的杯状细胞数目降低。这表明急性冷胁迫会改变中华鳖肠道黏膜的结构, 但在不同的肠段, 这种改变是不同的。回肠后段和大肠在同样的冷胁迫方式下黏膜机械屏障的不同变化情况, 提示中华鳖肠道各段对急性冷胁迫具有特殊的应对方式。
感染草鱼呼肠孤病毒对肠道菌群多样性的影响
朱文根, 李星浩, 饶刘瑜, 黄洁, 余育和, 肖凡书, 颜庆云
2019, 43(1): 109 -116 doi: 10.7541/2019.014
[摘要](232) [HTML全文](109) [PDF 718KB](29)
摘要:
为揭示草鱼呼肠孤病毒(Grass Carp Reovirus, GCRV)对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肠道菌群的影响, 在通过人工浸泡方式感染GCRV后, 采用针对16S rRNA基因的高通量测序技术对草鱼肠道菌群的组成和多样性进行了研究。结果显示, 感染组与对照组差异显著(MRPP, Anosim, Adonis, P<0.01), 且感染组肠道菌群的Alpha多样性指数(Shannon-Wienner、Inverse Simpson、Pielou evenness)显著低于对照组(t-test, P<0.05)。此外, 肠道菌群在感染组个体间差异显著大于对照组(Wilcoxon test,P<0.05), 表明患病草鱼肠道菌群失去原有平衡而变得紊乱。尽管病毒感染组和对照组草鱼肠道优势菌门均为Proteobacteria、Firmicutes、Bacteroidetes、Fusobacteria, 但在OTU水平仍表现出明显的变化, 如OTU_69(Pasteurellaceae)、OTU_504(Comamonadaceae)和OTU_1898(Cetobacterium)在感染GCRV组丰度显著降低(t-test, P<0.05), 也表明GCRV感染可使草鱼肠道微生态发生紊乱。肠道菌群结构稳定对于宿主健康具有重要意义, 研究患病鱼肠道菌群状况为鱼类常见疾病的防控提供科学依据, 也为健康养殖提供参考。
西伯利亚鲟幼鱼骨骼系统解剖研究
刘钊, 赵仲孟, 杨世勇, 黄小丽, 陆颖, 冯杨, 段靖, 杜宗君
2019, 43(1): 117 -122 doi: 10.7541/2019.015
[摘要](123) [HTML全文](46) [PDF 596KB](25)
摘要:
为了解西伯利亚鲟(Acipenser baeri)骨骼系统的形态特征, 采用传统的解剖法和透明骨法对西伯利亚鲟幼鱼进行解剖观察, 为西伯利亚鲟在形态学和分类学的研究提供基础资料。结果表明: 西伯利亚鲟幼鱼骨骼系统由主轴骨骼和附肢骨骼两部分构成, 主轴骨骼包括头骨、脊柱和肋骨, 附肢骨骼由鳍条、支鳍骨骼和带骨构成。对比分析发现, 西伯利亚鲟和施氏鲟骨骼系统的组成与构造较为相似, 其原因可能是其对高纬度低水温环境长期适应的结果。
河南省淮河流域鳑鲏亚科5种鱼形态差异分析
王景龙, 陈启豪, 陆文泽, 袁淑琴, 胡清霞, 岑双双, 周传江, 孟晓林, 聂国兴, 顾钱洪
2019, 43(1): 123 -132 doi: 10.7541/2019.16
[摘要](94) [HTML全文](51) [PDF 871KB](15)
摘要:
为进一步从可量性状比较中华鳑鲏(Rhodeus sinensis)、越南鱊(Acheilongnathus tonkinensis)、大鳍鱊(A. macropterus)、兴凯鱊(A. chankaensis)和斑条鱊(A. taenianalis)的种间形态差异, 丰富鳑鲏亚科鱼类的形态分类特征, 研究采用多变量形态度量学方法对河南省淮河流域这5种鱼的形态进行比较分析。结果表明: 这5种鱼在体宽/体长、头长/体长、吻长/体长、尾柄长/体长、背鳍基底长/体长、腹鳍长/体长、臀鳍长/体长和头长/吻长8个比值性状上存在极显著性差异(P< 0.01), 在全长/体长、体高/体长2个比值性状上存在显著性差异(P<0.05), 这些差异主要集中在鱼体的头部、尾部和鳍等部位。主成分分析、聚类分析和判别分析显示5种鱼存在显著性形态差异, 斑条鱊与越南鱊的差异程度最大, 与大鳍鱊差异程度最小。判别分析获得的判别准确率在82.35%—100.00%变化, 可以从一定的角度区分这5种鱼。
长江口日本鳗鲡降海产卵洄游群体的银化指标研究
郭弘艺, 郑丽, 叶亚蒙, 唐文乔, 张亚, 张旭光
2019, 43(1): 133 -141 doi: 10.7541/2019.017
[摘要](92) [HTML全文](34) [PDF 793KB](7)
摘要:
以长江口降海生殖洄游途中的日本鳗鲡为研究材料, 对繁殖群体银化过程中体色、年龄、全长、体重及银化指标等特征作了分析。结果显示, 依据“体侧黑色素沉积是否蔓延至胸鳍下缘”这一体色标准, 可将日本鳗鲡洄游群体分为银化前期和银化期二个发育期。日本鳗鲡银化过程中, 体型、胸鳍长、眼径、性腺指数呈递增趋势, 消化道指数则呈递减趋势。主成分分析亦表明, 银化期较银化前期的眼径和胸鳍增大, 还具有较高的性腺指数和较低的消化道饱满度。由于日本鳗鲡的产卵场位于3000 km之遥的马里亚纳海沟, 这些形态的修正可能是为了适应即将起始的长距离降海生殖洄游。根据银化指标所建立的判别方程, 对雌、雄群体银化前期和银化期的判别分析均取得了95%以上的成功率。研究认为, 长江口日本鳗鲡银化期的野外快速判别, 亦可采用“眼径指数大于5”作为识别依据。
长江湖口段春夏季仔稚鱼群落结构研究
刘熠, 杨习文, 任鹏, 李新丰, 方弟安, 徐东坡
2019, 43(1): 142 -154 doi: 10.7541/2019.018
[摘要](98) [HTML全文](44) [PDF 980KB](20)
摘要:
湖口江段连通长江与鄱阳湖, 是诸多鱼类的洄游通道, 在长江鱼类的繁衍生息中发挥重要功能。研究于2016年5月—8月在长江中下游鱼类繁殖期内对湖口江段系统开展鱼类仔稚鱼资源的调查, 研究分析了该江段仔稚鱼群落组成、优势种、密度变化、时间空间分布及其与环境因子的关系。结果表明:88d连续采样共鉴定出隶属于8目12科39个仔稚鱼类群, 其中37个类群鉴定到种, 1个类群鉴定到亚科, 1个类群鉴定到科。贝氏䱗(Hemiculter bleekeri)为该江段仔稚鱼的第一优势种, 其余优势种有虾虎鱼科(Gobiidae)、鳊(Parabramis pekinensis)和飘鱼(Pseudolaubuca sinensis)。仔稚鱼密度在7月1日达到峰值, 峰值为1230.77 ind./100 m3; 7月1日至8月15日仔稚鱼密度整体呈波动性下降的趋势。时间尺度的聚类将6个时期分为5月下旬—7月上旬与7月下旬—8月上旬2个群组, 贝氏䱗、翘嘴鲌和刀鲚等在6月下旬达到峰值; 鳊、四大家鱼和鳜等在7月上旬达到峰值。江段断面上南北近岸采样点仔稚鱼密度高于断面中心。使用冗余分析方法(RDA)分析了仔稚鱼密度与环境因子的关系, 发现水温、透明度、流量均为影响仔稚鱼群落结构的主要环境因子。水位与仔稚鱼密度相关性分析表明, 两者呈极显著相关(P<0.01)。研究表明, 湖口江段鱼类早期资源较为丰富, 仔稚鱼群落结构主要以中小型鱼类为主, 且江湖洄游性鱼类占比较高; 仔稚鱼对各环境条件有着不同适应特点, 仔稚鱼与水温、透明度、流量均呈现出不同程度的相关关系。研究结果补充了湖口江段鱼类早期资源的基础资料, 为长江中下游鱼类资源保护策略的制定提供了科学依据。
长江口水生动物食物网营养结构及其变化
徐超, 王思凯, 赵峰, 杨刚, 庄平
2019, 43(1): 155 -164 doi: 10.7541/2019.019
[摘要](291) [HTML全文](157) [PDF 683KB](44)
摘要:
为研究长江口水生动物食物网营养结构及其变化, 运用胃含物分析法研究了2016—2017年长江口及其邻近水域捕获的43种水生动物的食性类型与营养结构, 并与20世纪90年代和2006年文献数据进行了比较, 结果表明, 长江口及其邻近水域捕获的水生动物分为4种食性类型: 浮游生物食性、底栖生物食性、游泳生物食性、混合食性, 其中浮游生物食性消费者占绝对优势, 为39.53%; 游泳生物食性消费者所占比例最少, 为11.63%。所分析样品的营养级可分为3级, 其中植食性消费者占优势, 为76.75%; 中级肉食性消费者所占比例最少, 为4.65%; 与20世纪90年代相比, 12种常见鱼类的平均营养级由3.80下降到2.87。长江口水生动物食物网结构较为复杂, 生产者类型包括底栖藻类、浮游植物、有机碎屑3种, 主要由牧食食物链和碎屑食物链构成复杂的食物网。
浙江水源地水库浮游动物丰度和生物量与水质参数的通径分析
李共国, 徐杭英, 于海燕, 俞建, 韩明春
2019, 43(1): 165 -172 doi: 10.7541/2019.020
[摘要](119) [HTML全文](51) [PDF 716KB](20)
摘要:
为探明浙江水源地水库浮游动物群落特征及与环境因子的关系, 达到用浮游动物群落参数监测水源地水库水质的目的。于2014年1月至2016年10月, 对10个饮用水源地水库(K1—K10)展开了水质参数、浮游动物丰度和生物量的季节调查。采用多元逐步回归与通径分析的方法, 研究了浙江水源地水库环境因子与浮游动物群落之间的相互关系和作用过程。结果表明, 2014—2016年水库浮游动物平均密度97.5 ind./L, 主要由桡足类无节幼体(占36.3%)、轮虫(28.4%)和剑水蚤(20.0%)组成。平均生物量289.3 μg/L, 主要由枝角类(占39.3%)、剑水蚤(29.0%)和哲水蚤(14.5%)组成。Chl. a含量是春、夏季水库浮游动物丰度的决策因子, TP含量是秋、冬季群落丰度波动的限制因子, 春季TN通过N﹕P比率影响群落丰度。DO含量是冬季和夏季水库浮游动物生物量发展的决策因子, 冬季DO通过降低N﹕P比促进群落生物量发展。水库浮游动物现存量受到了TP含量消长、N﹕P比率变化, 以及最终反映的水体Chl.a含量共同影响。
辐照提高人工湿地美人蕉抗寒性及其越冬效果研究
郑文萍, 童伟军, 马琳, 张义, 吴振斌, 贺锋
2019, 43(1): 173 -180 doi: 10.7541/2019.021
[摘要](183) [HTML全文](111) [PDF 756KB](18)
摘要:
植物是人工湿地的重要组成部分, 但大多数湿地植物在低温环境下不能生存, 微生物活性受到抑制, 导致人工湿地低温应用受到限制。研究将辐照育种的手段应用于湿地植物, 以提高其抗寒性。研究采用25、45、60和80 Gy的γ射线对美人蕉(Canna indica L.)种子进行辐照, 剂量率为6 Gy/min, 待幼苗长出后进行阶段性降温培养, 并评价各组抗寒性。结果表明: 在低温下, 辐照幼苗的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性均高于对照组。对照组丙二醛(MDA)在低温下大量积累, 且含量显著高于辐照组。在低温条件下, 幼苗脯氨酸、可溶性糖、蛋白质含量高于对照组。辐照组抗寒性得分高于对照组, 45 Gy组得分最高。随后将最佳辐照处理的美人蕉种植于人工湿地, 对其冬季净化效果进行评估, 评价指标包括: 总磷(TP)、总氮(TN)、化学需氧量(COD)。结果发现, 45 Gy辐照组人工湿地的冬季TP去除率显著高于对照组(P<0.05)。由此可见, 辐照处理能够有效提高美人蕉的抗寒性, 并提高人工湿地冬季净化效果。
光叶眼子菜响应夏季高温的模拟研究
邱念伟, 高珊, 周培军, 舒凤月, 侯元同, 周峰
2019, 43(1): 181 -188 doi: 10.7541/2019.022
[摘要](85) [HTML全文](50) [PDF 787KB](5)
摘要:
为探讨南四湖优势物种光叶眼子菜在夏季浅水区的衰亡原因, 用25℃、30℃、35℃和40℃的恒温水浴模拟夏季高温处理光叶眼子菜(Co. Potamogeton lucens L.)3h。生化结果显示, 在35℃及以上高温下, 光叶眼子菜的蛋白质含量、可溶性糖含量和叶绿素含量显著下降, 丙二醛含量显著上升, 说明35℃以上高温对光叶眼子菜产生了显著伤害。光叶眼子菜的光合系统对高温更为敏感, 在高温胁迫下标准化的叶绿素荧光动力学曲线上J相和K相显著隆起, 但并未发现明显的L-band。进一步解析叶片的叶绿素荧光动力学参数, 结果显示: 随着处理温度的升高, 反应中心的初始关闭速率(dVG/dto, dV/dto)变慢, 但到达P相的所需时间(Tfm)变短; 光系统Ⅱ (Photosystem Ⅱ, PSⅡ)的光化学效率(Fv/Fm)减小, 非光化学效率(Kn)、J相相对可变荧光强度(Vj)和热耗散(DIo/RCDIo/CSoFo/Fm)增大; 尽管高温下质体醌周转次数(N)、还原速率(Sm/Tfm)和I相相对可变荧光强度(Vi)变化不显著, 但质体醌库(Sm)明显减小; 单个反应中心光能的吸收(ABS/RC)和捕获效率(TRo/RC)增加, 电子传递效率(ETo/RC)却呈下降趋势; 单位激发态面积的光能捕获(TRo/CSo)和电子传递效率(ETo/CSo)均降低, 反应中心数目(RC/CSo)显著减少。上述高温胁迫效应导致整个叶片的结构功能指数(SFIabs)、性能指数(PIabs)以及光合驱动力(DF)显著降低。高温对光叶眼子菜的伤害主要是导致其光系统II放氧复合体失活、反应中心数目减少和反应中心的光化学效率下降, 进而诱导活性氧的产生, 对细胞造成伤害。因此, 光叶眼子菜属于对高温敏感的水生植物。
光强调控三角褐指藻对海洋酸化的生理学响应
曾晓鹏, 徐锦涛, 邓子权, 方逸麟, 何铭华, 夏建荣
2019, 43(1): 189 -195 doi: 10.7541/2019.023
[摘要](96) [HTML全文](48) [PDF 767KB](9)
摘要:
光和海洋酸化(CO2浓度升高)分别对海洋硅藻的光合能力具有不同程度的影响, 但两者的耦合响应被较少关注。研究以三角褐指藻作为实验材料, 测定了不同光强下CO2浓度升高对三角褐指藻的生长、净光合速率、生化组分、胞外碳酸酐酶(eCA)活性和核酮糖-1,5-二磷酸羧化/氧化酶(Rubisco)活性的影响。结果显示在低光下, CO2浓度对三角褐指藻的生长和净光合速率(Pn)并没有显著影响, 而在高光下, 具有明显的影响。无论是在高光或是低光下, eCA活性、叶绿素和可溶性蛋白的含量都随着CO2浓度的升高而降低。在低光下, 高浓度CO2 (HC)培养下的Rubisco活性分别是低浓度CO2 (LC)和中浓度CO2 (MC)的2.42和1.39倍, 而在高光下, HC培养下的Rubisco活性分别是LC和MC的6.72和3.45倍。以上结果表明硅藻能够通过调节光合生理特征和CCM运行中能量的分配来适应环境中光强和CO2浓度的变化。
一株新型自絮凝凯式拟小球藻的两步培养产油技术
赵艳, 汪成, 王超霞, 王天圻
2019, 43(1): 196 -204 doi: 10.7541/2019.024
[摘要](106) [HTML全文](58) [PDF 743KB](7)
摘要:
以分离获得的一株新型自絮凝凯式拟小球藻(Parachlorella kessleri) F01为材料, 自养单步培养法为对照, 设计两步培养法, 研究阶段Ⅰ添加葡萄糖兼养和阶段Ⅱ营养元素限制处理对藻细胞油脂积累及絮凝性能的影响。分别采用血球板计数法、干重法、脂染色法测定藻细胞浓度、生物量和总脂含量, 三维荧光光谱分析藻细胞胞外聚合物(Extracellular polymeric substances, EPS)组分和含量。结果表明: (1)两步培养法阶段Ⅰ兼养培养最适葡萄糖浓度为10 g/L, 10d收获时藻细胞油脂产率204.25 mg/(L·d), 是对照组的16.20倍; 静置12h的藻细胞自絮凝率96.1%, 与对照组差异不显著。(2)在阶段Ⅰ基础上, 阶段Ⅱ进行不同元素限制处理培养1d, 低糖组和低糖低氮协同处理组的藻细胞油脂产率分别为242.64和227.61 mg/(L·d), 分别比阶段Ⅰ增加18.8%和11.4%; 培养4d, 低糖、无糖、低氮和低糖低氮协同4种处理组油脂产量显著高于对照组和阶段Ⅰ, 其中低糖低氮协同处理组最高, 达到3.08 g/L, 是对照组的23.69倍, 比阶段Ⅰ增加了51.0%, 而且阶段Ⅱ中4种处理组藻细胞的自絮凝率基本在85.0%以上, 能满足收获要求。(3) F01藻细胞EPS中蛋白类色氨酸物质含量高低与藻细胞自絮凝率大小密切相关, 不同培养处理通过改变藻细胞EPS中蛋白类色氨酸物质的含量而影响其絮凝性能。自絮凝凯式拟小球藻F01是生物柴油生产的优良潜力藻种, 两步培养法能大幅提升其产油效益。产油微藻的自絮凝优势与两步培养法结合, 有望成为解决微藻生物柴油生产技术瓶颈的关键突破口。
毛枝藻对人工污水脱氮除磷能力的研究
李鲁丹, 胡征宇, 刘国祥
2019, 43(1): 205 -212 doi: 10.7541/2019.025
[摘要](175) [HTML全文](97) [PDF 879KB](15)
摘要:
文章探究了2株毛枝藻(Stigeoclonium sp.)SHY-370及HB1617在不同初始氨氮浓度以及不同氮磷比条件下的生长情况与氮磷去除能力。结果表明氨氮浓度对2株毛枝藻的生长及TP去除能力均有一定的影响, SHY-370可耐受最大氨氮浓度为10 mg/L, HB1617为5 mg/L; 氨氮浓度为1—10 mg/L时SHY-370及HB1617对其去除率均达到97%以上, 最大去除速率为3.98 mg/(L·d)。氮磷比对SHY-370的生长影响不大, 但在氮磷比大于20时HB1617的生长受到抑制; SHY-370对 \begin{document}${\rm{NO}}_3^ – $\end{document} -N去除的最佳氮磷比为10—40, HB1617为2—10; 氮磷比为2时水体中TP的含量超过了SHY-370及HB1617所能去除的最大值, 去除率较低。实验结果表明SHY-370及HB1617在污水深度脱氮除磷方面具有一定的潜力, 可考虑将其应用于城市生活污水二级出水(TN≤15 mg/L、TP≤0.5 mg/L、 \begin{document}${\rm{NH}}_4^ + $\end{document} -N≤5 mg/L)的深度处理。
棕鞭藻及其培养滤液对铜绿微囊藻生长及生理特性的影响
施军琼, 杨燕君, 董聪聪, 张红波, 吴忠兴
2019, 43(1): 213 -218 doi: 10.7541/2019.026
[摘要](163) [HTML全文](54) [PDF 680KB](22)
摘要:
为探究藻类之间的可能存在的信息传递, 研究了棕鞭藻(Ochromonas sp.)及其培养滤液对铜绿微囊藻的生长及生理特性的影响。结果发现, 3种不同接种比例(1﹕4、1﹕1和4﹕1)的棕鞭藻与微囊藻共培养下, 微囊藻细胞密度到第4天均下降到最低值, 而棕囊藻细胞密度则显著增加。同时, 棕鞭藻培养滤液能够抑制微囊藻的生长、导致丙二醛(MDA)含量和过氧化氢酶(CAT)活性。此外, 棕鞭藻培养滤液也能促进微囊藻胞外多糖(EPS)含量显著增加。这表明棕鞭藻不仅能吞噬微囊藻, 而且可能释放某些化感物质抑制微囊藻生长及生理参数。这暗示了棕鞭藻可作为潜在的藻类水华控制生物, 抑制早期藻类大量增殖。
带形蜈蚣藻盘丝体孢子的形成及温度和光照强度对其放散的影响
陈蕾, 卞瑶, 周旭, 娄宇, 依朋, 王宏伟
2019, 43(1): 219 -225 doi: 10.7541/2019.027
[摘要](169) [HTML全文](58) [PDF 741KB](31)
摘要:
在实验室条件下, 首次发现了带形蜈蚣藻(Grateloupia turuturu)盘状体产生的丝状体能够形成孢子, 暂命名为“盘丝体孢子”。研究详细观察了该盘丝体孢子的形成过程, 并探讨了不同温度6、12、16、20、24和30℃及不同光照强度10、30、45、60、90和120 μmol/(m2·s)对盘丝体孢子放散的影响。结果表明: (1) 带形蜈蚣藻雌配子体的囊果释放果孢子, 果孢子发育形成盘状体, 盘状体经过诱导再生出单列细胞的丝状体, 丝状体形成多室孢子囊, 并放散出大量盘丝体孢子; (2) 温度和光照强度均对丝状体中盘丝体孢子的放散产生显著影响。在温度为16℃、光照强度为60 μmol/(m2·s)时盘丝体孢子放散量有最大值; (3) 在温度低于12℃或高于24℃时, 盘丝体孢子的放散受到影响, 数量明显减少; (4) 在光照强度低于30 μmol/(m2·s)或高于90 μmol/(m2·s)时, 盘丝体孢子的放散明显受到抑制。研究结果补充了带形蜈蚣藻无性繁殖过程, 为其种质保存、人工育苗及养殖提供更为丰富的理论依据, 为探讨带形蜈蚣藻的起源与演化提供新思路。
综述
鱼体健康状况评价研究进展
王淼, 衣萌萌, 卢迈新
2019, 43(1): 226 -232 doi: 10.7541/2019.028
[摘要](248) [HTML全文](68) [PDF 466KB](64)
摘要:
鱼体的生长速度、摄食状况、器官和组织的发育、抗病力、环境适应能力以及对环境变化的自我调节能力等, 都与鱼体健康状况密切相关。随着水产养殖业的迅速发展, 如何科学地评价鱼体的健康状况显得愈发重要。文章综述了目前常用的几种鱼体健康状况评价方法及存在的问题, 探讨了利用现代计算机技术及生物技术, 开发鱼体健康状况评价新方法的可行性, 以期为水产养殖鱼体的健康评价提供新思路。

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